2020年2月3日，福州综合大学吴乔副教授公司在Nature Metabolism免费在线发稿了一篇“HK1 from hepatic stellate cell–derived extracellular vesicles promotes progression of hepatocellular carcinoma”的一篇文章。该钻研动用来自于集萃ob电竞官网入口 的Hk1f/f（品系代码：T052189）和Lrat-P2A-iCre（）小鼠型号完成钻研，融入免疫系统荧光技艺、GST pull-down实践、血清质组学分享等很多个技艺有效途径，阐明了肝星状体细胞中HK1使用胞外囊泡增加后可以高速度肝癌线程的措施。一并筛分到是一款减弱HCC最新进展的化学物质PDNPA，为HCC的缓解给予是一款新方案。

1、TGF-β促纤维化过程中诱导HSCs分泌lEV HK1

方便论述玻璃纤维素材料化流程中生殖神经元间座谈会，论述者在LX-2肝星状生殖神经元中分头别提炼了胞外大囊泡和胞外小囊泡，来开展血清质组学定性浅析。借助GO聚集定性浅析感觉HK1是TGF-β刺击后胞外大囊泡中源于聚集的血清的一个。TGF-β还可以推动小鼠肝星状生殖神经元借助胞外大囊泡的排泌量HK1。论述者用四氯化碳（CCl4）介导的肝玻璃纤维素材料化小鼠型号来开展论述，感觉玻璃纤维素材料化伴随胞外大囊泡外泌HK1。共焦点效果信息显示，TGF-β处置推动了HK1从线粒体向质膜的移动。除此之外，中毒表现TSG101显著性提高了胞外大囊泡中HK1的的排泌量。表面HK1是借助胞外大囊泡从肝星状生殖神经元特女性朋友的排泌量的，TGF-β介导线粒体HK1及运输到质膜，而TSG101进1步帮助HK1借助胞外大囊泡的排泌量。

图1.TGF-β诱发肝纤维材料化中lEV HK1的分秘

2、HK1的棕榈酰化促进了HK1靶向质膜的分泌

钻研者发展用去棕榈酰化酶减弱剂棕榈抑素B（PalmB）或TGF-β外理就可正相关增強HK1棕榈酰化系数，而用棕榈酰化减弱剂2-溴棕榈酸酯（2-BP）外理，则去除HK1的棕榈酰化。除此以外，纵然用TGF-β外理，HK1在质膜上的分析仍会被2-BP抑制作用，而当没了TGF-β外理时，会被PalmB增強。阐明TGF-β诱发的棕榈酰化有益于于HK1从线粒体转让到质膜，但是进行胞外大囊泡代谢排泌量。敲消除棕榈酰化酶ABHD17B就可比较明显增強HK1的棕榈酰化和代谢排泌量，而且应响了TGF-β对HK1的诱发。这样，在肝植物纤维化工作中，TGF-β进行减弱ABHD17B依赖关系的HK1的去棕榈酰化来促使HK1的代谢排泌量。

 

图2.TGF-β诱导HK1棕榈酰化并向质膜运输

3、HCC细胞劫持来源于肝星状细胞的lEV HK1以加速糖酵解过程

科研者对CCLE使用介绍发展，肝恶性肿瘤核理解出的HK1总体水平较为较低。不但，用共凝焦观察分析及对肝癌各种相关三维模型使用试验发展，HCC组织上皮細胞膜核核中的HK1蛋白质或许非是本身理解出的，然而是來出自于对肝星状组织上皮細胞膜核核分秘的lEV HK1的摄食。主要是因为HK1在糖酵解中的必要的作用，小说作品科研发展Huh7和HepG2组织上皮細胞膜核核常见常见葡萄品种品种糖溶解和胞外硝化作用率（ECAR）显然上升的症状在HK1敲除的症状下都没有遭受。当再一次理解出HK1时，行增加Huh7和HepG2组织上皮細胞膜核核常见常见葡萄品种品种糖摄食量、ECAR的特性及及组织上皮細胞膜核核分裂繁殖症状。不但，用糖酵解抑制作用剂解决Huh7和HepG2组织上皮細胞膜核核时，lEVs不要促使会组织上皮細胞膜核核分裂繁殖。得出结论肝星状组织上皮細胞膜核核发出的HK1用糖酵解重源程序促使会HCC组织上皮細胞膜核核的分裂繁殖。

 

图3.HCC神经组织细胞劫持由来于肝星状神经组织细胞的lEV HK1以提高糖酵解

4、HSC衍生的lEV HK1促进小鼠模型中的HCC进展

关键在于加大力度骤摸索lEV HK1与HCC区间内的内在联系，小说作家对小鼠肝癌绘图完成探析，知道lEV HK1特殊推进恶性恶性恶性肿瘤成长，从而伴渐渐Ki67的核蛋白程度上升。就能够 对Hk1f/f与Gfap-Cre的小鼠完成改良品种，获取在肝星状体人体细胞中 特喜欢的人敲除Hk1的小鼠（Hk1f/f；Gfap-Cre），其恶性恶性恶性肿瘤成长及HK1和Ki67呈现遭受治理和改善。不仅，探析者知道肝星状体人体细胞特征的HK1能看不出推进肝癌的肺适当传递，且适当传递企业中的HK1呈现上升，呈现lEV HK1就能够推进恶性恶性恶性肿瘤的进展情况。

图4.其他前提诱导性的小鼠三维模型说明了lEV HK1在可以淡化HCC现况中的意义

5、Nur77抑制HSC分泌lEV HK1以抑制肝癌的发展进程

据新闻报导，孤核淀粉酶激酶Nur77可仰制TGF-β诱惑的人造纤维化。探析者可以 将Nur77转染到LX-2内部中核实了这些许。Nur77可以调涨ABHD17B表达出来，敲除Nur77或敲除ABHD17B后，lEV HK1的排出提升且棕榈酰化开展。表示Nur77仰制lEV HK1棕榈酰化以阻拦 HK1的排出。探析者再生利用各不相同淀粉酶激酶的仰溶液剂清理LX-2内部，出现PI3K-Akt路经的仰溶液剂LY294002能阻绝TGF-β诱惑的Nur77的挥发。显然，当HK1在肝星状内部中被非特异朋友敲除时，Nur77的丢失不在影响到肿癌种子发芽。表示Nur77可以 仰制肝星状内部排出lEV HK1，于是仰制肝癌的发展趋势过程。

 

图5.Nur77可抑制HSC产生lEV HK1

6、小分子PDNPA靶向Nur77以抑制lEV HK1的分泌

探讨者使用建立察觉到小团伙有机化合物PDNPA能与Nur77配体组合域组合，所以妨碍了Akt与Nur77的也可以 功能，并可观恢复功能TGF-β削减的Nur77血清质能力，治理和改善性HK1的外泌。与此同时PDNPA在基因组和血清质能力上恢复功能了ABHD17B的表示，然后阻住了TGF-β引诱的HK1棕榈酰化和分泌出液。在小鼠肝受损細胞癌模式中，PDNPA也可以可观提高肉瘤比率及肉瘤组织开展中HK1和Ki67的表示。在肝星状受损細胞中 特喜欢的人删了Nur77后，PDNPA功能被削减。所以，PDNPA引诱的Nur77表示的提高使用治理和改善性肝星状受损細胞分泌出液lEV HK1然后治理和改善性肝癌的发展进步线程池。

图6.PDNPA促进Nur77的抒发以控制lEV HK1的的分泌

结论

以上所述研究探讨探讨表述，在肝玻纤化流程中，肝星状神经元中TGF-β能进行PI3K-Akt方式引发Nur77光降解，引发ABHD17B的表达方法收到调节，这样明显增强了HK1的棕榈酰化，推进HK1转入到质膜并进行lEVs产生。而肝星状神经元由来的lEV HK1可以被HCC神经元劫持来推进糖酵解重编程序和肝癌的发展前景程序。因此，研究探讨探讨发现了小分子式有机化合物PDNPA靶向药物Nur77以调节TGF-β引发的HK1产生，而使有效性延长时间肝癌发作。

补充知识：

肝星状策划 （Hepatic stellate cells，HSCs）核心通过胰腺玻纤化，或者与肝策划 癌（HCC）联系融洽[1-2]。基本都数HCC案例是在强烈的胰腺玻纤化或肝软化的的情况印发生的。促玻纤化策划 神经内部系膜TGF-β在生长和策划 稳定的时候中调着各个的时候，在玻纤化的胰腺中强烈增多以促活肝星状策划 [3]。临床研究药理动态数据显视，活性的肝星状策划 与HCC病患者的生存率不佳关干，后以多的方式反应HCC的转型[4-5]。胞外囊泡（EVs）在良性恶性肿瘤微室内环境的策划 间学习交流中充分发挥着关键点帮助，能以为最早的时候HCC就诊的生物技术标志的意思物[6-7]。探析EV介导的HCC策划 和肝星状策划 彼此的充分帮助还有机会进步推动临床研究药理缓解。糖酵解重程序设计也是胰腺玻纤化的一款 必要本质特征[8]。Hexokinase（HK）是糖酵解的必要限速酶产品之一，对夏黑葡萄糖注射液的用至关必要。近来，HK1被我认为行推动良性恶性肿瘤的分解代谢重程序设计[9]，以至于HK1在HCC进展情况中的实用功能尚不明确的。

 

参看论文资料[1]Duran, A. et al. p62/SQSTM1 by binding to vitamin D receptor inhibits hepatic stellate cell activity, fibrosis, and liver cancer. Cancer Cell 30, 595–609 (2016).[2]Yoshimoto, S. et al. Obesity-induced gut microbial metabolite promotes liver cancer through senescence secretome. Nature 499, 97–101 (2013).[3]Liu, X., Hu, H. & Yin, J. Q. Therapeutic strategies against TGF-β signaling pathway in hepatic fibrosis. Liver Int. 26, 8–22 (2006).[4]Han, S. et al. Activated hepatic stellate cells promote hepatocellular carcinoma cell migration and invasion via the activation of FAK-MMP9 signaling. Oncol. Rep. 31, 641–648 (2014).[5]Lin, N. et al. Activated hepatic stellate cells promote angiogenesis in hepatocellular carcinoma by secreting angiopoietin-1. J. Cell. Biochem. 121, 1441–1451 (2020).[6]Ge, Y. et al. Hepatocellular carcinoma-derived exosomes in organotropic metastasis, recurrence and early diagnosis application. Cancer Lett. 477, 41–48 (2020).[7]Li, X. et al. The significance of exosomes in the development and treatment of hepatocellular carcinoma. Mol. Cancer 19, 1 (2020).[8]Mejias, M. et al. CPEB4 increases expression of PFKFB3 to induce glycolysis and activate mouse and human hepatic stellate cells, promoting liver fibrosis. Gastroenterology 159, 273–288 (2020).[9]Amendola, C. R. et al. KRAS4A directly regulates hexokinase 1. Nature 576, 482–486 (2019).