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科研浪潮之下,基因编辑小鼠模型构建如何做到稳中求胜?

2024-05-31

基因编辑是一种对生物体DNA进行特定修饰的技术。该技术通常用于实现对基因的敲除或敲入等改造。基因修饰的动物模型如基因编辑小鼠,对于基因功能研究、新药研发等领域均具有极高的应用价值。


01. 基因编辑小鼠制备的主要6步

历余载来,什么是人类文明遗传遗传人类基因复制技木急剧建立完善,什么是人类文明遗传遗传人类基因复制小鼠范围广应运于人类文明病症症状食草动物建模方法的准备,为人正直类文明病症症状的患上基本原理、病症方式以其預防和的治疗等问题的科研展示了根本的素材内容。现按照什么是人类文明遗传遗传人类基因复制技木应该达到高效、性价比最高的什么是人类文明遗传遗传人类基因敲除、敲入、准确度的点变化等复制目的。核酸酶介导的什么是人类文明遗传遗传人类基因复制小鼠准备注意包括如下6个工作步骤:


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02. 什么是F0代,F1代小鼠?

实现染色体复制粘贴技能赚取的第一个代小鼠大部分被称作F0代小鼠(譬如染色体敲除,染色体敲入,也含有进行自由放入的方式赚取转染色体TG小鼠),F0大部分要有与相等显性基因病表观显性基因历史背景的野生植物型小鼠繁殖一批人以赚取性能够平稳显性基因病表观显性基因的F1代小鼠,F1代呈抗体阳性鼠出于F0代的呈抗体阳性配子(精子或卵上皮细胞),能能平稳将复制粘贴过的染色体显性基因病表观显性基因给子孙。F0和F1有所差异,无法上下级取代选择,原因F0的不判别性,这句话大部分不意见与建议互配的。


好于较ES cell打靶的方式方法,核酸酶介导的染色体撰写小鼠生产期限改变(质粒建设简单,不用再ES电转及淘汰),但Founder鼠(F0)都具有较高的嵌合率。


嵌合体被称为基因编辑的最*大安全风险之一,采用目前的基因编辑工具,有可能在一细胞期起作用,还有可能在二细胞期、四细胞期等阶段发挥作用,那这样形成的F0小鼠就有可能存在基因型的“嵌合”。正常个体的不同体细胞基因型通常一致,而“嵌合体”小鼠不同细胞中可能拥有三四种或更多种基因型。这会对小鼠的表型产生什么影响,是很难预测的。


稳定遗传的F1及后代个体之间的基因型一致性极高,对其进行表型分析的数据一致性高,可重复性强;而“嵌合体”小鼠由于不同个体之间基因型和嵌合程度的差异,其表型差异通常更大,且难以重复。此外,核酸酶介导的基因编辑不可避免地存在一定的基因组脱靶编辑,可能影响其他基因的表达和功能,而F0嵌合体的脱靶编辑未经过繁育分离稀释,对小鼠表型可能产生干扰。


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嵌合鼠


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符合文献综述

1. Ma BX, Shen WL, Wang X, et al. Gene edited animal models applied in human disease research. Chinese Journal of Biotechnology, 2020, 36(5): 849-860.2. Miura, Kento et al. “Progress of genome editing technology and developmental biology useful for radiation research.” Journal of radiation research vol. 62,Supplement_1 (2021): 153-163.