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ob电竞官网入口 > 资源中心 > 鼠库全书 > 实验报告保持稳相关性不方便,也许 是你的转基因水稻遗传小鼠类别没选对

实验稳定性不好,可能是你的转基因小鼠模型没选对

2024-07-05

实验稳定性关乎着结论的可靠性和可重复性。动物实验必须设计良好、符合伦理、有效执行、正确分析、清晰呈现,并正确解释,所获得的结论才能被学界接受和认可。那么,转基因小鼠等小鼠模型的选择为什么会影响到实验的稳定性?集萃ob电竞官网入口 为您解读。
近交系动物-有效控制动物模型的稳定性

近交系动物-有效控制动物模型的稳定性

近交系(Inbred strain),别称为纯系节肢各种动物,根据继续近亲滋生,植物的根在什么是基因型上基本上是一样的。如BALB/c小鼠、C57BL/6J小鼠等。近交系的最高均一性,可体现便用比较少的个人用户形成了还具有是一样的核算差距性性总体水平的最终结果。有文章讲解4个近交系(inbred strain)小鼠和好几个远交系(outbred strain)小鼠在环己巴比妥麻痹下的休眠的时间的时间的平均水平值和条件差,出现远交系的组内差距宏不小于近交系,形成了核算学差距需用的组内节肢各种动物贴近近交系的10倍。


为此分析也进的一步介绍信:染色体型的相同对科学试验范例量和科学试验成果的安全性具备至关非常重要的的作用。


表1.人类基因型的均一性在选定实验所样版量中的很重要作用(近交系与远交系小鼠在环己巴比妥局部麻醉实验设计中的唾眠事件)



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(a) 入组动物数目

(b) 平均睡眠时间Mean sleeping time

(c) 睡眠时间标准差,该值越低则代表组内数据越稳定。

(d) 满足标准统计差异性分析所需样本量,在4分钟以上差异比较中的双样本 t 检验中显示5%的显著性差异(p-value)和90%的统计功效(power of test)。该值越低则代表组内数据越稳定,越容易获得统计学差异。

(e) 睡眠时间差异4分钟以上的差异比较的统计功率(样本量固定为20小鼠/组)。该值越高代表获得统计学结论的可靠性越高。



四倍体补偿技术对实验稳定性的影响

四倍体技术,是最近较热门的一种新兴技术。小鼠正常2细胞期胚胎(二倍体)经过电脉冲可融合形成四倍体胚胎,四倍体胚胎具有发育缺陷,只能发育形成胚体以外的组织结构,如胎盘、脐带等,而胚胎干细胞(Embryonic stem cell, ESc)能够分化形成体内所有的细胞类型。因此四倍体技术可获得完全来自于ESc遗传的F0代小鼠(而不是嵌合鼠),甚至在F0代获得纯合中靶小鼠。这看似加速了转基因动物获得纯合动物的进程。然而,大量的文献显示,四倍体技术会出现移植生仔率低(存活率:5.6%和3.1%)(表2)和动物发育不全的问题。


表2. 八倍体高技术在C57BL/6N和BALB/c每种背景图片的ES人体细胞上赚取活下来两栖动物的成功失败率

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(PMID: 34676093)

(a) C57BL/6N背景多个ES克隆的数据,(b) Balb/c背景多个ES克隆的数据


为了控制转基因方式所带来的遗传和表型变量,通常会将F0动物与近交系背景动物多次繁育以稀释和去除遗传变量并获得纯系,这个过程称为Backcross(回交),以此获得携带目标遗传修饰的且具有稳定的遗传背景的纯系转基因动物(如下图)。因此,如果将四倍体补偿技术获得的F0代小鼠直接用于动物实验,风险是不可控的!!!


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(所有图片改进自维基百科全书)图1. Backcross(回交)以取除转DNA食草动物配制带来了的基因函数 



集萃ob电竞官网入口 为最 程度较得到保障调查中操作的两栖动物模式化的相对稳定的处理,一般而言交房可相对稳定的显性基因的F1代小鼠,为这位的科研开发工做保驾领航!


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