Cre工具鼠是一种基因敲除小鼠，可以通过Cre重组酶系统实现特定基因的敲除，在条件性靶基因功能研究、疾病模型研究等方面发挥着极大作用。而荧光报告Cre工具鼠作为Cre工具鼠的好搭档，又有哪些用途呢？集萃ob电竞官网入口 带你一探究竟。

什么是荧光报告Cre工具鼠？

利用基因工程技术手段，将“loxP-STOP-loxP (LSL)-Reporter gene”插入到小鼠基因组内，这样构建的小鼠模型就称为Cre报告工具鼠^[1]。常见的报告基因包括β-半乳糖苷酶（lacZ）报告基因、荧光素酶（luciferase）报告基因和荧光报告基因，以荧光蛋白作为报告基因的小鼠就称为荧光报告Cre工具鼠。常用的荧光报告基因包括绿色荧光蛋白EGFP/ZsGreen，黄色荧光蛋白EYFP，青色荧光蛋白ECFP，红色荧光蛋白mCherry/tdTomato等^[2]。

图1. Cre报告工具鼠策略图^[1]

当荧光报告工具鼠与Cre工具鼠杂交，双阳性子代通过Cre介导的重组使得报告基因在特定细胞类群中启动表达，从而实现了细胞荧光标记和谱系追踪^[3]，还可用于监测重组酶的活性和表达范围^[4]。荧光报告系统已被用于检测基因编辑效果，Alapati等人使用Rosa26-mT/mG双荧光报告小鼠证明在胎儿发育过程中CRISPR-Cas9基因编辑试剂在子宫内的精确定时递送会导致胎儿肺中靶向和特异性基因编辑^[5]。

除此之外，Cre常与Dre工具鼠联用进行谱系追踪[6]，记录肝脏中的细胞增殖^[7]，追踪癌症转移和纤维化中的EMT^[8]，并阐明心脏干细胞在心脏修复过程中的作用^[9]。

荧光报告Cre工具鼠模型优势

1.自发荧光，非酶促反应

相比较于荧光素酶和β-半乳糖苷酶，荧光血清参与荧光不需要增添底物，显像简略。

2.颜色多用

有各种不同色调的荧光血清或血清变体可供选泽，同样体现 许多神经元型。

3.定量分析

运用荧光显微镜或流式神经元术神经元术可一定量深入分析荧光的相对比较表现抗压强度。

图2. R26R-Confetti小鼠：随机多色的Cre荧光报告鼠^[3]

集萃ob电竞官网入口 荧光报告Cre工具鼠品系

1.红色荧光报告工具鼠 T058417 H11-CAG-LSL-tdTomato

本品系在一身传达爱的CAG启动服务器子后接连一款含带LSL队列的tdTomato，并将其敲入小鼠16号染料体的H11安全管理位点。当Cre重新组合酶普遍存在时，伴随loxP重新组合，小鼠dna组中的STOP删了除，tdTomato被传达爱并在led灯光引起公布出惹眼的红色的荧光。

图3. H11-CAG-LSL-tdTomato仿真模型方法举手图

部分验证数据展示：

图4. H11-CAG-LSL-tdTomato整治荧光三维成像测量

Cre-：H11-CAG-LSL-tdTomato单抗体阳性小鼠；Cre+：Rosa26-EIIA-iCre,H11-CAG-LSL-tdTomato 双抗体阳性小鼠

2.绿色荧光报告工具鼠 T057823 Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA

本品系在身上描述的CAG开始子后拼接同一个可能含有LSL编码序列的EGFP，并将其敲入小鼠-6复染体的Rosa26安全卫生位点。当Cre整体上市酶具有时，会因为loxP整体上市，小鼠什么是基因组组中的STOP被移除，EGFP什么是基因组描述被激话，产生了草绿色荧光球蛋白。

图5. Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA型号管理策略展示图

部分验证数据展示：

图6. Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA型号荧光显像验测

Cre-：Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA单弱阳小鼠；Cre+：TgTn(pb-CAG-iCre)，Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA 双阳性反应小鼠

3.双色荧光报告工具鼠 T006163 H11-CAG-LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato (B6-G/R)

本品系在一身上下呈现的CAG启动的子后接触某个双荧光数据刺绣体ZsGreen和tdTomato，并将其敲入小鼠 15号刺绣体的H11人身安全位点。当Cre合拼酶出现时，原因loxP合拼，小鼠刺绣体组中的ZsGreen和STOP被移除，小鼠将由一身上下泛绿变黑成独特组织机构的红光。

图7. B6-G/R实体模型方法图示图

部分验证数据展示：

图8. CAG-G/R模式荧光成相判断

Cre-：B6-G/R单阳性反应小鼠；

Cre+：Rosa26-EIIA-iCre，B6-G/R 双阳型小鼠

图9. B6-G/R实体模型流式的体细胞术定量分析

Cre-：B6-G/R单抗体阳性小鼠，

Cre+：H11-Cd4-iCre，B6-G/R双阳型小鼠

相关品系：

不仅据此3种荧光Cre生产平台鼠，集萃ob电竞官网入口 还数字化生产研发了多种类荧光报表生产平台鼠，具有200+Cre生产平台鼠品系，50+报表鼠品系，盖住神经末梢控制系统软件、免疫性控制系统软件等几个设计方案层面。亚太证书的甲壳动物安全设施和要严格的质控标准规范让设计方案更安心，喜爱管理咨询了解一下。

参看学术论文：[1]Li, Siang, and Cord Brakebusch. "Reporter Mice for Gene Editing: A Key Tool for Advancing Gene Therapy of Rare Diseases." Cells 13.17 (2024): 1508.[2]Ghim, Cheol-Min, et al. "The art of reporter proteins in science: past, present and future applications." (2010).[3]Snippert, Hugo J., et al. "Intestinal crypt homeostasis results from neutral competition between symmetrically dividing Lgr5 stem cells." Cell 143.1 (2010): 134-144.[4]Bittner-Eddy, Peter D., Lori A. Fischer, and Massimo Costalonga. "Cre-loxP reporter mouse reveals stochastic activity of the Foxp3 promoter." Frontiers in immunology 10 (2019): 2228.[5]Alapati, D., et al. "In utero gene editing for monogenic lung disease. Sci Transl Med 11." (2019).[6]Tang, Juan, et al. "Arterial Sca1+ vascular stem cells generate de novo smooth muscle for artery repair and regeneration." Cell stem cell 26.1 (2020): 81-96.[7]He, Lingjuan, et al. "Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair." Science 371.6532 (2021): eabc4346.[8]Li, Yan, et al. "Genetic fate mapping of transient cell fate reveals N-cadherin activity and function in tumor metastasis." Developmental cell 54.5 (2020): 593-607.[9]Li, Yan, et al. "Genetic lineage tracing of nonmyocyte population by dual recombinases." Circulation 138.8 (2018): 793-805.